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細胞培養(yǎng)篇,選到無菌耗材避免細菌污染

發(fā)布日期:2023-10-16 17:23:54   瀏覽量 :794
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養(yǎng)細胞的人最最怕的就是細胞污染,細胞一污染,一夜回到解放前,一切都得從頭開始,尤其是新手小白,幾乎都逃不過細胞污染的魔咒。    避免細胞污染,最重要的是操作前和操作時。   

1.  操作前,要保證所有的用品無菌,移液槍槍頭、離心管、培養(yǎng)瓶、PBS、培養(yǎng)基、血清等。     高壓滅菌,一般要提前一天高壓滅菌,滅菌結(jié)束后放烘箱烘干,為確保充分烘干,一般需要過夜。要確保一定被高壓過,像我們實驗室就發(fā)生過沒被高壓的槍頭盒放烘箱里了,從高壓鍋里拿瓶子時一定要擰緊瓶蓋,否則就白壓了。   

2.操作前紫外燈照射超凈臺20min左右。實驗前打開超凈臺的通風,用酒精棉球?qū)⑴_面擦一遍,所有進入超凈臺的東西都要噴酒精。     

3.操作時,所有的玻璃瓶打開前都需在酒精燈上烤一圈,畢竟“病從口入”嘛,將瓶蓋放在左側(cè)(清潔區(qū)),保證操作時不會從上方經(jīng)過。   

4.操作時注意槍頭,做到懸空加樣,尤其是給非無菌的離心管里加東西,給含有細胞的皿里加東西,如你從玻璃瓶里給一個含有細胞的培養(yǎng)皿里加培養(yǎng)基,那么你的槍頭就不能伸到培養(yǎng)皿的液體里,否則你的培養(yǎng)基就污染了,除非你每次換槍頭。     

5.注意袖口,胳膊,切記不要從打開的瓶,皿上面越過,防止落菌。

6.手拿所有的蓋子時,一定不要碰到里面。

7.實驗結(jié)束后,用酒精燈燒所有的瓶口、蓋子,擰緊,用封口膜封好,我們的封口膜一般是提前剪好泡在含有酒精的瓶子里。

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